|
z dimensie) in dit object scherpe xy-beelden worden opgenomen. Zo verkrijgt men dus een z-stapel van xy opnamen, vergelijkbaar met een stapel pannekoeken (zie een animatie van een xyz-serie bestaande uit 27 plaatjes verkregen met stappen van telkens 6 micrometer hoogteverschil). De xyz opnamen kunnen vervolgens tot een geheel worden samengesteld dmv projecties.Verder kunnen er opnamen gemaakt worden op verschillende tijdstippen (t), waardoor bewegingen en veranderingen in structuren overtijd bestudeerd kunnen worden (t dimensie). Tenslotte kan het emissielicht van fluorescerende stoffen op grond van verschillen in kleur (=golflengte licht, afgekort lambda) over verschillende kanalen worden gedetecteerd. Zo kunnen in een en hetzelfde preparaat meerdere specifieke merkstoffen, ieder met een eigen fluorescentiespectrum, tegelijkertijd gescheiden waargenomen worden, wat nuttig kan zijn om de relatie tussen verschillende structuren te kunnen achterhalen. FRAP (Fluorescence Recovery After Photobleaching) is een methode die toegepast wordt om de mobiliteit van stoffen in een monster te analyseren: eerst wordt het object plaatselijk weggebleekt met een hoge dosis laserlicht en daarna wordt het herstel van fluorescentie vastgesteld, wat een functie is van de migratie van deeltjes/moleculen vanuit de omgeving naar het donkere deel toe. FRET (Fluorescence Resonance Energy Transfer) is een andere bijzondere techniek die informatie oplevert over de afstand tussen twee type -fluorescerende- moleculen met specifieke FRET-eigenschappen, bijv. een activator en een receptor; hierbij wordt excitatie-licht energie door de ene molecuul geabsorbeerd en naar de andere stof 'onder water' doorgegeven, maar alleen indien de twee naburige moleculen binnen een bepaalde straal van elkaar verkeren, waardoor de tweede molecuul fluorescentie-licht gaat uitstralen.
|